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2022年8月20日
发表者 kimi1006
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小分子蛋白wb做不出来?

一个小分子蛋白做了很多次wb结果一直不好。后来总算做出来了,把经验写下来。

1.胶用12.5%的或者15%的。

2.转膜时间100v 30min就够了(或者300mA 30 min),如果你的小分子蛋白丰度很大,随便你转多久。(看到marker都没转过去,没关系的,10-20-25mar[……]

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2022年8月18日
发表者 kimi1006
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ChIP-seq的Input(对照) | Public Library of Bioinformatics

ChIP-seq的Input(对照)

关于对照

说到实验设计就不得不提到对照。从小老师教育我们,没有对照组的实验是不完整的,或者说就没有任何意义。所有的生化湿实验都很讲究完整的正对照和负对照。当然,下面的实验我都没做过。。。

蛋白相关实验真真假假的事情太多[……]

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2022年8月14日
发表者 kimi1006
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如何进行CRISPR/Cas9介导的基因敲除的验证?|细胞|蛋白|显子|翻译_网易订阅

本文来源于“吉凯基因”,已获授权转载

近期关于CRISPR/Cas9系统做编码基因的KO(敲除)的验证方法问题,收到很多咨询。大体分成两个,分别是:是否可以通过用qPCR检测目的基因的mRNA来验证是否有敲除效果?以及是否可以直接用wb验证目的蛋白的表达量来验证是否[……]

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