一个小分子蛋白做了很多次wb结果一直不好。后来总算做出来了，把经验写下来。

1.胶用12.5%的或者15%的。

2.转膜时间100v 30min就够了（或者300mA 30 min），如果你的小分子蛋白丰度很大，随便你转多久。（看到marker都没转过去，没关系的，10-20-25marker的过去了就行，甚至10-20-25marker没有全过去也没关系，你的蛋白丰度和marker丰度不一定。）

3.0.22um的膜，其实0.45um的pvdf膜也能做出来，但是0.22um的好一点。

不要贪心，和其他很多蛋白一起跑，将就其他蛋白的条件，很容易事倍功半，这个跑出来了你再跑其他的，一点不耽误事。