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小分子蛋白wb做不出来?

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一个小分子蛋白做了很多次wb结果一直不好。后来总算做出来了,把经验写下来。

1.胶用12.5%的或者15%的。

2.转膜时间100v 30min就够了(或者300mA 30 min),如果你的小分子蛋白丰度很大,随便你转多久。(看到marker都没转过去,没关系的,10-20-25marker的过去了就行,甚至10-20-25marker没有全过去也没关系,你的蛋白丰度和marker丰度不一定。

3.0.22um的膜,其实0.45um的pvdf膜也能做出来,但是0.22um的好一点。

不要贪心,和其他很多蛋白一起跑,将就其他蛋白的条件,很容易事倍功半,这个跑出来了你再跑其他的,一点不耽误事。

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