有几种可能，

1，公司的测序结果有误或者本身不靠谱（可能性低于50%）；

2，抗体有问题，抗体本身无法正确识别靶蛋白，你需要通过过表达实验来验证抗体是否有效，原有条带是不是假阳性（可能性大于60%）；

3, 第一外显子敲除13bp后生成了非正常mRNA，但没有影响到CDS区及其附近的核糖体结合序列（可能性大于80%）。

4，目的蛋白本身存在剪切体，太靠近N端有可能发生剪切表达，可以称为细胞类型特异的Variant。比如TEAD1基因，到现在表达起始点都有争议。（可能性低于50%）

5，目的蛋白存在分子量相近的family number，在目的蛋白敲除以后发生代偿性表达增加，加之抗体的特异性不够而检测到条带（可能性低于50%）。

建议首先针对敲除位点设计primer进行QPCR验证，注意严格阳性对照。然后验证抗体。如果是抗体问题就好办，如果是其他任何问题就必须重新设计gRNA敲除，建议针对2、3外显子并且位于CDS区设计gRNA。

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