市面上有不用冲洗的DAPI+抗淬灭剂出售,而且挺好用,这样省两个步骤,很香。

2.丙酮或多聚甲醛固定5-10min;
3.PBST洗5 minx3次;
4.(可选)抗原修复可选;
5.(可选)0.1% Triton-100X透膜;
4.加山羊血清封闭液或3%BSA封闭30min;
5.弃去封闭液,滴加相应抗体(1%BSA稀释),保湿盒中4℃过夜;
6.PBST洗 5 minx3次; 
7.滴加二抗,避光,37℃,1-2 h;
8.PBS洗 5 minx3次; 
9.DAPI染色 5 min; 
10.PBST洗 5 minx3次;
11.滴加抗淬灭封片剂并用盖玻片封片;
12.荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察并拍照。

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