丛林

2016年6月16日星期四

局域网中共享Lantern上网(iphone ios)

Lantern作为一款非常好用的上网软件,深受大家喜爱,但是由于目前没有ios版,所以iPhone用户上网很麻烦,这里介绍一下如何共享Lantern使局域网内的设备都能正常上网。

1、电脑端设置:右键Lantern桌面图标,选择属性->快捷方式中的目标选项,空格隔开后在后面增加一条  -addr 你电脑的ip地址:8787,例如-addr 192.168.199.166:8787,保存后重启Lantern。

2、手机端设置:确保手机和电脑在同一个局域网内,进入WiFi选项,点击你所连接的WiFi后面的小叹号,进入设置,修改下面的HTTP代理为手动,服务器里填电脑ip,端口填8787,然后你的手机就可以正常上网了!

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R语言如何实现文献计量——bibliometrix包的使用 – 知乎

R语言如何实现文献计量——bibliometrix包的使用

表现我们真正的自我,比我们所具有的能力更重要。

本文参考了R语言统计与绘图走天涯徐小洋地理数据科学公众号的文章,膜拜大神!推荐大家关注!(两位老师请后台结一下广告费( • ̀ω•́ )✧)另外R语言统计与绘图公众号的文章来源于生态R学社 ,作者生态R学社,感谢大佬提醒,同样推荐关注生态R学社(๑> <)☆

上周组会的时候,老板提到让大家学习一下文献计量的方法,推荐了CiteSpace这个软件,我之前有试着用过这个软件,确实挺好用的,就是用起来不太顺手 ̄へ ̄。

我想起之前在R语言统计与绘图公众号上看到了引自生态R学社的bibliometrix,快速实现文献计量分析的酷炫R包这篇文章,就想试一下,正好假期整理之前在微信浮窗的好文章(PS.有木有人和我一样,在微信更新浮窗无数量限制后,里面堆满了无数的文章),发现了徐老师的R语言文献计量分析初探,如获至宝,仔细阅读两篇文章之后,决定自己也记录一下这么酷炫的R包ヾ(゚∀゚ゞ)

bibliometrix包官网:https://www.bibliometrix.org/index.html

1 准备

1.1 安装bibliometrix包:

install.packages(‘bibliometrix’, dependencies=TRUE)

借助R的shiny工具,叫做BiblioShiny,它的底层其实就是Bibliometrix包

通过以下方式调用这个shiny程序:

library(bibliometrix)
biblioshiny()

第一次启动Shiny程序,可能会由于缺少某些支持的包而报错,可以手动安装一下对应缺失的包。

如上图就是缺少‘httpuv’这个名字的程辑包,安装就行:

install.packages("httpuv")

如此缺啥补啥,直到可以运行为止(=゚ω゚)ノ

成功后会自动调用你的默认浏览器,出现如下工作界面:

1.2 文献数据准备

bibliometrix包官网给出了支持的文献搜索引擎和引文格式:

以Web of Science为例,我搜索的是我目前在做的Atmospheric carrying capacity,注意:这里记得数据库选择核心合集,不然后面导出时会有问题

然后导出为其他文件格式,这里记录内容要选择全纪录与引用的参考文献,支持的BibTeX、 plaintext和EndNote Desktop格式都可以选,我这里选择纯文本。

一次只能导出500条,我有774条记录,导出了两次,然后把这两个txt文件压缩为.zip格式( ̄︶ ̄)

2 导入数据

在刚打开的浏览器中,选择Data→Import or load files,导入数据:

导入成功如下ヾ(=・ω・=)o:

3 开始分析

3.1 数据情况

3.1.1 年发文量

Dataset→Annual Scientific Production

统计年发文量

3.1.2 平均每年引用量

Dataset→Average Citations per Year

3.1.3 三个字段之间关系的桑基图

Dataset→Three-Fields Plots

看三个字段之间关系桑基图

3.2 文章来源分析

3.2.1 主要相关文章来源

Sources→Most Relevant Sources→Apply

3.2.2 来源聚类分析

Sources→Source clustering through Bradford’s Law

3.2.3 来源影响因子

Sources→Source Impact

支持H指数、G指数、M指数和总被引量

3.2.4 来源活跃度

Sources→Sources Dynamics

3.3 作者分析

3.3.1 最相关作者

Authors→Most Relevant Authors

3.3.2 作者不同时间发文情况

Authors→Authors’ Production over Time

通过这个可以显示不同作者发文情况,发文最多的前20名作者发文时间段和发文量,统计发文量前多少名的作者可以自由设置。

3.3.3 相应的作者的国家

Authors→Corresponding Author’s Country

3.3.4 发文机构比较

Authors→Most Relevant Affiliations

3.3.5 发文量国家比较

Authors→Country Scientific Production

3.3.6 被引量国家比较

Authors→Most Cited Countries

3.4文章分析

3.4.1 最高被引文章

Documents→Most Global Cited Documents

3.4.2 Reference Spectroscopy

Documents→Reference Spectroscopy

3.4.3 词云分析

Documents→WordCloud

3.4.4 Word Dynamics

Documents→Word Dynamics

3.4.5 Trend Topics

Documents→Trend Topics

3.5 Coupling Map

3.6 热点和共现网络

3.6.1 共现网络

3.6.2 Thematic Map

3.6.3 Thematic Evolution

3.6.4 因子分析

3.7 时序图

3.8 Collaboration WorldMap

就是这样啦,我都试着弄了弄,挺好玩的(*・ω-q),bibliometrix包真是够酷炫。

大家还有什么好玩的用法,可以评论呀ヾ(=・ω・=)o

有机会我再写一下CitySpace的用法

下次见( ̄︶ ̄)

编辑于 2021-05-03 22:22

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Micro CT中的骨分析参数解读_中国生物器材网

Micro CT中的骨分析参数解读_中国生物器材网

Micro CT中的骨分析参数解读
点击次数:30199 发布日期:2018-12-20 
来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
一、背景简述

MicroCT是一种结合了影像学检查无创性和组织学检测高分辨率特点的技术,由于骨骼与其它身体组织在X射线衰减性能方面有相对明显差别,因此Micro CT特别适合骨骼成像,骨骼参数的研究也是MicroCT的重要应用领域之一。
在前面的文章里,我们分享了Micro CT在骨分析中的一些案例,今天再和大家介绍一下Micro CT中的骨分析参数。

二、骨分析参数解读

骨由骨质、骨膜、骨髓、骨的血管、淋巴管和神经构成。在Micro CT中,可对骨质部分进行深入的形态学分析和研究。骨质分密质和松质:骨密质配布于骨的表面,也称皮质骨;骨松质由骨小梁排列而成,配布于骨的内部,骨小梁的排列与骨所承受的压力和张力的方向一致,因而能承受较大的重量。骨髓腔和松质间隙内充填有骨髓。[1]
借助影像处理软件,可在Micro CT的扫描成像图上选择感兴趣区域(region of interest,ROI)做阈值分割等操作,可以将皮质骨和松质骨进行分割,分别提取到不同组织区域,从而对皮质骨和松质骨(骨小梁)的各种形态学特性进行研究和分析,得到表征骨骼生长和发育水平的参数(见表1)。
表1、 通用骨分析参数表
指标名称 简写 单位 解释及意义
通用参数 骨表面积 BS mm2 通过移动立方体算法对骨组织进行三角测量计算的骨组织表面积
组织体积 TV mm3 指感兴趣区域总体积,该指标主要根据研究者或研究重点观察区域而定
骨体积 BV mm3 指感兴趣区域中被定义为骨组织的体积
骨表面积骨体积比 BS/BV 1/mm 表示单位体积骨组织的面积大小
骨表面积组织体积比 BS/TV 1/mm 又称为骨表面积密度,可以间接反映骨量多少
骨体积分数 BV/TV % 表示骨组织体积与组织体积比值,可直接反应骨量变化情况
骨矿物质含量 BMC mg 表示感兴趣区域骨组织中,所含骨矿物质量的多少
骨矿物质密度 BMD g/cm3 表示感兴趣区域骨组织中,骨矿物密度的多少
在通常情况下,当比较对象感兴趣区域骨组织(TV)相同时,BV和骨体积分数BV/TV都能反映骨量多少;骨表面积骨体积比值(BS/BV)和骨表面积组织体积比值(BS/TV),可以间接反映骨量多少;骨体及分数(BV/TV)是皮质骨和松质骨骨量评价常用指标,对于髓腔内松质骨而言,该比值能够反应不同样本骨小梁骨量的多少,该值增高说明骨合成代谢大于分解代谢,骨量增加,反之亦然,从而能够间接反应骨代谢状况。在评价长骨中段皮质骨骨量和骨代谢状况方面具有同样的价值。

进一步的,借助主要成分为羟基磷灰石的体模,可以根据体模在Micro CT中的成像灰度值,来计算和分析皮质骨/松质骨的组织骨密度(TMD,Tissue Mineral Density)或骨矿物质密度(BMD,Bone Mineral Density)。因骨组织总矿物质含量和矿化程度因解剖部位、生长状态、性别及年龄等因素存在较大差异,对于骨骼研究有重要价值,Micro CT不仅可以迅速地获得样本的BMD,而且不会破坏骨组织标本结构,这与传统评价矿化程度的方法(如定量显微成像术、散射电子显微镜及灰份含量)相比,具有显著优越性[2]。

2.1 骨小梁分析及结构参数
骨小梁是皮质骨在松质骨内的延伸部分,即骨小梁与皮质骨相连接,在骨髓腔中呈不规则立体网状结构,如丝瓜络样或海绵状,起支持造血组织的作用。骨小梁连接而成的多孔网架结构,按应力曲线规律性排列,具有非均匀的各向异性,这种排列能增加骨强度,可以说,骨小梁的骨质量与其微结构密切相关[3]。因此,对于骨小梁的微结构分析在骨分析中是非常重要的。Micro CT可对骨小梁微结构进行无损3D成像,展示骨小梁的微结构,使得对于骨小梁微结构的拓扑学分析成为可能。

从骨小梁的微结构可计算得到骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁分离度(Tb.Sp),这些是评价骨小梁空间形态结构的主要指标。在骨分解代谢大于骨合成代谢时情况下,比如发生骨质疏松时,Tb.N和Tb.Th数值减少;Tb.Sp数值增加。(注:进一步的,这些参数分析可推广到多孔材料的研究,Tb.Th和Tb.Sp数值可理解为孔壁厚度和孔隙率。)

骨小梁模式因子(Tb.Pf)、各向异性程度(degree of anisotropy,DA)和骨小梁连接密度(Conn.D)也是表现骨质状态的重要参数。

比如1)骨小梁模式因子(Tb.Pf)用于形容骨小梁表面凹凸程度,其与结构模式指数(SMI),是描述小梁结构组成结构中板层结构和杆状结构比例的参数。如果结构中骨小梁主要为板层结构,那么SMI接近于0;反之,如果主要是杆状骨小梁,SMI则接近3。发生骨质疏松时,骨小梁从板状向杆状转变,该值增大。2)各向异性程度(DA)用于评价骨小梁的方向性和对称性,指椭圆体截距长度平均值(MIL)中长径和短径的比值,该比值越大说明各向异性程度越大。在骨质疏松早期,承重骨小梁DA值通常增加,随着骨质疏松加剧,DA会减小。3)骨小梁连接密度(Conn.D)表示每立方毫米体积中骨小梁网状结构之间的连接数量。

在Micro CT的扫描成像结果中,对这些参数进行分析,便可对骨小梁的强度和骨质量进行研究。

 

图1、平生公司NEMO®Micro CT扫描下的骨小梁对比
(上:正常大鼠股骨骨小梁;下:骨质疏松大鼠股骨骨小梁)

表2、骨小梁分析参数表

指标名称 简写 单位 解释及意义
骨小梁分析参数 骨小梁数目 Tb.N 1/mm 代表感兴趣区域中,每mm中骨组织与非骨组织交点数量的平均值
骨小梁厚度 Tb.Th μm 表示骨小梁平均厚度
骨小梁分离度 Tb.Sp μm 表示骨小梁之间髓腔平均宽度
骨小梁模式因子 Tb.Pf 1/mm 是衡量骨小梁连接度的一个指标,有相对凸性或凹性。该值降低提示骨小梁由杆状向板状变化,发生骨质疏松时Tb.Pf增加,即骨小梁从板状变为杆状
结构模式指数 SMI 描述小梁结构组成结构中板层结构和杆状结构比例的参数。如果结构中骨小梁主要为板层结构,那么SMI接近于0;反之,如果主要是杆状骨小梁,SMI则接近3
各向异性程度 DA 用于评价骨小梁的方向性和对称性
骨小梁连通性 Connectivity 表示感兴趣区域内骨小梁网状结构之间的连接数量
骨小梁连接密度 Conn.D 1/mm3 表示每立方毫米体积中骨小梁网状结构之间的连接数量
分形维数 FD 用于评价骨小梁的不规则度和复杂度
2.2 皮质骨分析及相关参数
相对于骨小梁而言,对于皮质骨的研究较少。但有研究表明,在发生骨质疏松的时候,皮质骨会承担更多的强度负荷,皮质骨本身的内在性质及孔隙度影响着骨强度的变化。应力作用下,骨皮质变化晚于骨小梁,起初皮质骨宽度增加,厚度变薄且分层,进而疏松化,最终可呈细线状,相应的骨密度检测也证实了这一点。因此,皮质骨的参数分析也有利于全面地了解骨生长和骨疾病中的情况。
图2、平生公司的NEMO® Micro CT扫描下的皮质骨对比
(左图紫色部分:正常大鼠股骨皮质骨;右图紫色部分:骨质疏松大鼠股骨皮质骨)
除了通用的参数计算外,皮质骨分析中还可以获得如下指标:皮质骨总面积(Tt.Ar)、皮质骨面积(Ct.Ar)、皮质骨厚度(Ct.Th)和骨髓腔面积(Ma.Ar)。皮质骨总面积(Tt.Ar)的增大表示骨形成的增加;皮质骨面积(Ct.Ar)能综合反映内外骨表面的变化;骨髓腔面积(Ma.Ar)能反映骨内膜骨吸收的情况[4]。
表3、皮质骨分析参数表
指标名称 简写 单位 解释及意义
皮质骨参数 皮质骨总面积 Tt.Ar mm2 为皮质骨横断面的总面积
皮质骨面积 Ct.Ar mm2 为皮质骨横断面的平均截面积
皮质骨厚度 Ct.Th μm 感兴趣区域皮质骨的平均厚度
皮质骨面积和总面积的比值 Ct.Ar/Tt.Ar % 表示皮质骨横断面的平均截面积和总面积的比值
骨髓腔面积 Ma.Ar mm2 表示骨髓腔在中段骨横截面骨组织中的平均截面积
三、总结

在骨组织研究领域,Micro CT可以很好地研究骨结构和骨密度的数量性指标及微细改变,可指导组织工程、基因工程等科学研究,已逐渐发展为可加强甚至代替组织学分析的一种成熟的技术,Micro CT在各学科的广泛应用拥有广阔的市场前景,也将为各学科的研究带来新的发展机遇。

注:

  • 王云钊等.骨关节影像学(第2版).科学出版社,2010.7
  • 魏占英,章振林. Micro-CT在骨代谢研究中骨微结构指标的解读及应用价值.中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志[J], 2018(2): 200-205;
  • 裴葆青;王田苗;王军强. 松质骨微观骨小梁结构的生物力学综合分析. 北京航空航天大学学报[J], 2008(02): 215-218.
  • [4]. 骨形态计量学目前应用专家共识. 中国骨质疏松杂志. 2014, 20(9): 1031-1038.

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药物性牙龈增生的前因后果

药物性牙龈过度生长,也被称为药物性牙龈肿大,先前也称之为药物性牙龈增生,是环孢素(CsA)和他克莫司(TAC)等钙调神经磷酸酶抑制剂,苯妥英钠(PHT)等抗惊厥类药物和氨氯地平及硝苯地平等钠通道阻滞剂(CCBAs)等药物比较显著的副作用。

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Micro CT 中的骨分析参数解读

骨由骨质、骨膜、骨髓、骨的血管、淋巴管和神经构成。在Micro CT中,可对骨质部分进行深入的形态学分析和研究。骨质分密质和松质:骨密质配布于骨的表面,也称皮质骨;骨松质由骨小梁排列而成,配布于骨的内部,骨小梁的排列与骨所承受的压力和张力的方向一致,因而能承受较大的重量。骨髓腔和松质间隙内充填有骨髓。[1]
借助影像处理软件,可在Micro CT的扫描成像图上选择感兴趣区域(region of interest,ROI)做阈值分割等操作,可以将皮质骨和松质骨进行分割,分别提取到不同组织区域,从而对皮质骨和松质骨(骨小梁)的各种形态学特性进行研究和分析,得到表征骨骼生长和发育水平的参数(见表1)。
 

指标名称 简写 单位 解释及意义
通用参数 骨表面积 BS mm2 通过移动立方体算法对骨组织进行三角测量计算的骨组织表面积
组织体积 TV mm3 指感兴趣区域总体积,该指标主要根据研究者或研究重点观察区域而定
骨体积 BV mm3 指感兴趣区域中被定义为骨组织的体积
骨表面积骨体积比 BS/BV 1/mm 表示单位体积骨组织的面积大小
骨表面积组织体积比 BS/TV 1/mm 又称为骨表面积密度,可以间接反映骨量多少
骨体积分数 BV/TV % 表示骨组织体积与组织体积比值,可直接反应骨量变化情况
骨矿物质含量 BMC mg 表示感兴趣区域骨组织中,所含骨矿物质量的多少
骨矿物质密度 BMD g/cm3 表示感兴趣区域骨组织中,骨矿物密度的多少

表1、 通用骨分析参数表

在通常情况下,当比较对象感兴趣区域骨组织(TV)相同时,BV和骨体积分数BV/TV都能反映骨量多少;骨表面积骨体积比值(BS/BV)和骨表面积组织体积比值(BS/TV),可以间接反映骨量多少;骨体及分数(BV/TV)是皮质骨和松质骨骨量评价常用指标,对于髓腔内松质骨而言,该比值能够反应不同样本骨小梁骨量的多少,该值增高说明骨合成代谢大于分解代谢,骨量增加,反之亦然,从而能够间接反应骨代谢状况。在评价长骨中段皮质骨骨量和骨代谢状况方面具有同样的价值。
进一步的,借助主要成分为羟基磷灰石的体模,可以根据体模在Micro CT中的成像灰度值,来计算和分析皮质骨/松质骨的组织骨密度(TMD,Tissue Mineral Density)或骨矿物质密度(BMD,Bone Mineral Density)。因骨组织总矿物质含量和矿化程度因解剖部位、生长状态、性别及年龄等因素存在较大差异,对于骨骼研究有重要价值,Micro CT不仅可以迅速地获得样本的BMD,而且不会破坏骨组织标本结构,这与传统评价矿化程度的方法(如定量显微成像术、散射电子显微镜及灰份含量)相比,具有显著优越性[2]。

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粘接修复的失败和提示——姜婷教授_牙釉质

粘接修复的失败和提示——姜婷教授


2020-04-24 18:04

粘接修复是一种常用的口腔修复治疗方式,本文从典型的粘接修复方式入手,详细介绍各类粘接修复失败的表现和对临床工作者的提示。

作者:姜婷

北京大学口腔医院

典型的粘接修复

典型的对牙体缺损和牙列缺损的口腔粘接修复包括粘接在牙釉质表面的全瓷贴面(唇贴面、舌贴面和 贴面)和粘接固定义齿(粘接桥),粘接在牙本质表面的玻璃纤维增强树脂桩核以及全冠,同时粘接在牙釉质和牙本质表面的嵌体修复、高嵌体修复和部分冠修复等。

全瓷贴面 通过使用全瓷贴面可以很好地修复前牙间隙(图1)、牙釉质发育不全(图2)、异色牙等美学缺陷。

图1 二硅酸锂增强热压铸造玻璃陶瓷贴面关闭牙间隙

图2 全瓷贴面修复牙釉质发育不全

粘接固定义齿 对于前牙缺失、两侧基牙因牙周病而松动的患者,使用玻璃纤维增强的复合树脂材料,通过夹板式粘接固定义齿的修复方式,不但可以恢复缺失牙的功能,改善美观效果,而且对两侧松动的基牙可以起到固定的作用,如果患者还存在牙龈退缩的问题,还可以使用牙龈色树脂进行软组织的修复,提高美学效果(图3)。

图3 玻璃纤维增强瓷化树脂夹板式粘接桥修复下颌前牙缺失

高嵌体修复 对于根管治疗后的牙齿,与传统的桩核冠修复方式相比,覆盖全 面的高嵌体修复方式更微创。对于缺损面积有限的根管治疗牙的修复,采用全冠修复会磨除60%左右的牙体组织,如果采用高嵌体修复方式,可大大减少磨牙量,保留牙体组织,通过髓腔洞型引导高嵌体就位并增加辅助固位,亦可达到良好的抗折和修复效果(图4)。

图4 CAD/CAM切削(二硅酸锂增强玻璃陶瓷)高嵌体修复根管治疗后的下颌第二磨牙

覆盖咬合面的高嵌体或者 面部分冠在应力传导上优于只覆盖部分咬合面的嵌体,为防止根管治疗牙折裂,优选将 面全覆盖的 贴面或者 面部分冠;对于多次充填失败,存在较大 面或邻 面缺损的活髓牙的修复,高嵌体亦可以达到较好的修复效果(图5)。

图5 咬合面大面积缺损形成窝洞的上颌第一磨牙(活髓牙)用高嵌体进行修复

另外,牙齿 面中重度磨耗的活髓牙病例也适用于高嵌体或者 贴面修复。这类患者往往存在牙齿敏感、咀嚼效率下降等情况,修复后可缓解患者的临床症状,恢复牙齿的功能(图6)。

图6 中重度磨耗的下颌第二磨牙用CAD/CAM切削玻璃陶瓷 贴面粘接覆盖改善症状

在进行这种修复时,最重要的是尽可能的保留和利用牙釉质进行粘接。基牙预备时不过多去除牙体组织,只是降低高陡的牙尖,预备围绕咬合面的互相平行的垂直向短轴面和1 mm宽的直角肩台,或者在原有缺损洞型外不额外预备肩台,只做微创基牙预备,仔细去除洞型周边的悬釉组织,避免侧向咬合力作用时存在过薄牙体组织而发生折断,降低牙尖高度保证咬合面留有充分的修复体间隙。

粘接力到底有多大?

是否能满足临床的需求?

粘接修复成功与否和有多少粘接面积尤其是牙釉质面积密切相关。通常,牙釉质的粘接强度要大于牙本质, 实验室检测粘接强度可用微剪切和微拉伸粘接强度、抗折强度等方法。牙釉质在全酸蚀后的平均树脂粘接强度(剪切力)为30 MPa/cm2,牙本质则为20 MPa/cm2,而不同牙位的牙釉质粘接面积举例如表1。

表1 不同牙位的牙釉质粘接面积

粘接力的表示常以压强MPa 为单位,1MPa≈10 Kg/cm2,成年人的咬合力约为22.4~68.3kg,所以只要有1 cm2以上的牙釉质粘接面积,剪切粘接力就大于咬合力。当然,咬合力负载方向主要以垂直向和侧向力为主,和实验室里的检测方向是有区别的,不能简单的推测是否能抵抗咬合力的大小,而且在临床上牙体预备量不同,剩余牙釉质的量也不同。以上颌中切牙唇侧为例(图7),牙釉质厚度在牙颈部只有0.3~0.4 mm,在中部只有0.5~0.7 mm,在切缘只有0.7~0.9 mm,在牙体预备过程中,一旦磨除牙釉质过多,就可能造成牙本质暴露,增加贴面脱落和折裂的风险。材料过薄容易发生折裂,使实际粘接强度发生变化,在牙体预备时一定要注意保留充分量的牙釉质和剩余牙体组织。根管治疗后下颌第二磨牙的牙釉质厚度约0.1 cm(图8)。

图7 中切牙唇面平均尺寸

图8 根管治疗后下颌第二磨牙的牙釉质厚度(约0.1 cm)

不同类型粘接修复的失败和提示

全瓷贴面的失败

全瓷贴面的失败表现主要是贴面脱落(图9)和折裂。

图9 瓷贴面脱落,考虑基牙预备过深,牙釉质剩余过少

根据临床研究,全瓷贴面的10 年平均存活率是86%,而粘接面全部是牙釉质时成功率高达99%,仅边缘为牙釉质时成功率是94%,贴面边缘在牙本质上时失败率是牙釉质时的10 倍。牙冠延长后行瓷贴面修复的失败率增加2.3倍。另有研究显示,失败率和瓷贴面的厚度及牙釉质的厚度成反比。

要保证粘接修复长期稳定要注意以下几点:充分的粘接面积,比如牙釉质粘接面积在70%以上;基牙预备在牙釉质厚度之内;选择合适的树脂粘接系统,能达到光固化初期固定后加强光固化使树脂充分聚合;表面污染影响粘接强度,止血剂降低牙本质粘接强度,所以粘接时要良好隔湿并避免污染;修复材料具有一定的强度和厚度以避免折裂。要控制咬合力对修复体的影响,比如避免咬在瓷贴面的粘接界面,去除咬合干扰,在下颌前伸运动到对刃位时,上下前牙同时接触,天然牙重接触,修复体轻接触,后牙脱离接触;在下颌侧方运动时,工作侧尖牙和/或一对以上的后牙颊尖同时接触,非工作侧后牙脱离接触,使力分散,免于创伤。

粘接义齿的失败

粘接固定义齿的失败表现为脱粘接(15%)和折裂(4.1%),而折裂最常发生在翼板和桥体的连结体处(图10~11)。研究显示,粘接固定义齿的5年平均存活率为91.4% [95% 可信区间(CI) 为86.7~94.4%],10年平均存活率为82.9% (95% CI为73.2~89.3%)。其中,氧化锆支架的存活率高,单端桥体的存活率高,前牙的存活率高。

图10 玻璃纤维增强树脂粘接桥的连接体断裂

图11 玻璃纤维增强树脂粘接桥脱落

为了减少脱粘接的比例,应该注意在不影响牙周健康和咬合的情况下尽量加大翼板的粘接面积,使用弹性大的树脂粘接系统,粘接过程需要有严格隔湿措施(如使用橡皮障);对于连接体容易折断的现象,应该特别注意以下几点:尽量做到连接体高度大于4 mm,厚度大于1 mm,连接体横断面积大于16 mm2,必要时增加厚度和材料强度。为了避免对牙周健康的不良影响,翼板的下缘(舌侧边缘)要位于龈上1 mm,翼板和连接体下方不压迫龈乳头,粘固后彻底去除多余树脂水门汀,维持牙齿生理形态,定期进行彻底牙周洁治,对患者进行口腔卫生指导。

高嵌体的粘接失败

高嵌体的失败主要表现为修复体折裂和脱落(图12),折裂主要发生在修复体过薄或厚度不均时薄厚交界的应力集中处。有研究显示,高嵌体的10年生存率大于90%,例如210个后牙热压铸瓷(IPS Empress)高嵌体3 年失败率在3.33%。研究也发现第二磨牙的高嵌体失败率高,死髓牙的高嵌体失败率高,材料厚度小于2mm时高嵌体失败率高。高嵌体边缘在牙本质上时失败率远高于在牙釉质上。全酸蚀(酸蚀-冲洗)的3步粘接法成功率较高。

图12 重度磨耗牙用贴面修复后上颌第二磨牙贴面折裂

临床制作高嵌体的常用材料有瓷化树脂、玻璃纤维(E 玻璃纤维或石英纤维)增强瓷化树脂、热压铸造二硅酸锂增强玻璃陶瓷、以及CAD/CAM切削+烧结二硅酸锂增强玻璃陶瓷等。当修复体较薄(小于1.5mm)时,玻璃纤维增强瓷化树脂的抗折强度较大,而修复体有一定厚度(大于1.5mm)时,CAD/CAM 切削+烧结二硅酸锂增强玻璃陶瓷的抗折强度较大。

高嵌体的粘接修复也需要保证充分的粘接面积,当同时依赖牙釉质和牙本质混合粘接时应注意有足够的牙釉质面积(50%以上),如果牙釉质不完整或缺损超过一壁,则应该改设计为全冠修复体。选择双重固化的树脂粘接系统。另外,修复体应该有充分的强度和厚度,避免厚度不均产生应力集中线;粘接时隔湿处理避免污染;咬合接触调整为邻牙紧密接触时的高嵌体轻接触。

如果修复体脱落后需要再粘接,则牙釉质表面粘接时强度无变化,但牙本质表面再粘接时强度下降。

玻璃纤维桩树脂核的粘接

玻璃纤维桩树脂核失败的主要表现是桩/桩核脱落或者玻璃纤维桩折断后桩核冠脱落(图13)。用成品纤维桩+树脂核的临床研究显示11%(4/36牙)的前牙桩核折裂,2.6%(2/73牙)的后牙桩核折裂。平均整体存活时间是90 个月。原因有脱落患牙的牙本质肩领不足、固位形差和桩核粘接后边缘发生微渗漏,造成粘接失败。2 mm 以上的牙本质肩领是保证桩核冠能长期存留的重要因素(图14)。

图13 玻璃纤维桩树脂核脱落后的基牙状态,缺乏充分牙体组织,唇侧和邻面的牙本质肩领高度小于0.5 mm。桩核表面有污染着色,有粘接界面的微渗漏和粘接失败

图14 牙本质肩领对牙冠脱位的抵抗作用

(本文部分内容参考自姜婷教授主编,人民卫生出版社2019 年出版的《实用口腔粘接技术图谱》一书)

作者简介

姜婷,北京大学口腔医学院修复科教授,主任医师,博士生导师,从事口腔修复学和学相关的医教研工作及临床咬合、口腔粘接修复、骨组织工程再生等方面科学研究;承担多项国家自然科学基金项目和省部级科研项目。是中华口腔医学会口腔修复学专委会委员,是国际牙科研究会、国际修复学院等国际学术团体会员。在国内外核心杂志发表专业论著70余篇,获得北京市科技二等奖(第二人)一次、三等奖(第三人)两次。主编和参编专业书籍及翻译专业书籍17部,包括《全口咬合重建》、《实用口腔粘接修复技术图谱》等。2015年获得北京大学医学部优秀教师称号。

第294期03~05版

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Isolation and Culture of Primary Human Gingival Epithelial Cells using Y-27632 | Protocol

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01:53

02:00

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Isolation and Culture of Primary Human Gingival Epithelial Cells using Y-27632

DOI: 10.3791/62978

章节

0:00Introduction

0:49Gingival Tissue Pretreatment

1:13Digestion of Gingival Tissue

2:46Cell Passage

3:51Representative Results

6:18Conclusion

Summary


November 6th, 2021

Here we present a modified method for the isolation and culture of human gingival epithelial cells by adding the Rock inhibitor, Y-27632, to the traditional method. This method is easier, less time-consuming, enhances stem cell properties, and produces larger numbers of high-potential epithelial cells both for the laboratory and for clinical applications.

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从0到1:手把手教你设计繁育方案_搜狐汽车_搜狐网

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从0到1:手把手教你设计繁育方案


2019-01-17 17:00:00



基因敲除、条件性基因敲除、点突变、条件性点突变、基因敲入、人源化等等,各种类型的小鼠模型越来越多地被应用到生物医学研究中。同时,获得新的基因修饰小鼠也变得越来越容易。这让我们能够组合出更多全新的小鼠模型,让多种功能或多种遗传改变能最终在同一只小鼠上实现。比如,在一个A基因点突变的小鼠上敲除B基因、同时还带有另一种细胞示踪的荧光标记。

听上去很酷!仔细想想,这意味着需要将3种甚至4种小鼠品系交配到一起。真的繁育起来可就不是那么简单了,很可能会弄得手忙脚乱。

因此,制定一份有效的繁育方案显得尤为重要。怎么才能用最快的速度、最高的效率、最少的成本来获得自己想要的新品系呢?今天,我们就来详细分解。

基础:孟德尔定律与旁氏表

旁氏表(Punnett square),也叫棋盘法,是用于预测特定杂交或育种实验结果的一种图表,可以预测后代中拥有特定基因型的概率。

单基因杂交旁氏表示例

每个后代个体拥有基因型BB、Bb及bb的概率分别为25%、50%及25%。

双基因杂交旁氏表示例

推荐使用树形图,因为树形图对于双/多基因杂交的情况会更为直观、方便。

第一步:确定基因型

确定繁育方案的第一步,也是最关键的一步,是确定实验和对照组所需要的小鼠基因型。无论是只有单基因突变或者转基因,还是涉及到多个基因,都需要在开始繁殖之前清楚地明确自己的最终目标。

“在目标设定不明确时就匆忙开始进行繁育”这是非常不正确的做法,却又是很多同学容易犯的错误。这会导致很多后续的问题,比如:产生所需小鼠的比例过低、没有产生适合的对照小鼠等等。

今天,我们以常见的条件性基因敲除Cre-lox系统为例:

  • 实验组小鼠:flox(带有loxP位点的基因)纯合子,以及Cre杂合子
  • 对照组小鼠:flox(带有loxP位点的基因)纯合子,以及Cre阴性(野生型)

第二步:倒推法上溯繁育路线

确定了最终的小鼠基因型后,就可以倒推一代,找到一种最高效的终端交配方式,能够最大程度同时获得实验组与同窝对照组小鼠。

你可以这样考虑:

  1. 找到实验组与对照组之间的共有目标等位基因。如果可以的话,把这个共有目标等位基因变成纯合子。
  2. 分别对每个等位基因进行杂交,然后把它们合并起来。

以常见的条件性基因敲除Cre-lox系统为例:

实验组和对照组都是flox(带有loxP位点的基因)纯合子,因此flox就是共有等位基因。由于两组都需要flox纯合子,因此最高效的方式是通过flox纯合子来繁育flox纯合子。

对于Cre基因,我们需要Cre杂合子和不带Cre(阴性)的野生型。如果通过Cre杂合子与野生型交配,那么预期产生50%杂合子和50%野生型。

flox纯合子 X flox纯合子

Cre 杂合子 X Cre阴性野生型

如此,最高效的终端交配方式就是:

flox纯合子;Cre 杂合子 X flox纯合子;Cre阴性野生型

这样我们可以获得50%实验组基因型小鼠和50%对照组基因型小鼠(这里没有考虑小鼠性别)。

如果看过我们的繁育手册的童靴们可能要问了,为什么手册上没有直接画出这个高比例的方式呢?

原因是,这里flox纯合子;Cre杂合子基因型的小鼠既是我们最终目标的实验组,又是终端交配的亲代。而flox的基因在Cre重组酶作用后被敲除,可能已经产生了一些表型影响到生殖或发育,因此并不是每一种flox纯合子;Cre杂合子都适合用于作为繁育的亲代。

接下来继续向上反溯亲代的杂交方式,直到现有小鼠的基因型。通常来说,可以的话尽量获得并使用纯合子。这样既能高比例的获得带有突变的子代,又能减少繁育中使用小鼠的数量。

再次以Cre-lox系统为例:

  1. 将flox纯合子与Cre 杂合子杂交,可产生50% flox杂合子;Cre 杂合子。
  2. 将flox杂合子;Cre 杂合子与flox纯合子杂交,可产生25% flox纯合子;Cre 杂合子小鼠和25% flox纯合子;Cre阴性小鼠。

细心的你可能又发现了,这个图好像还是跟繁育手册上的不太一样嘛。为什么呢?

因为起点不同。这种最高效的繁育方式的起点是已经获得了足够数量的flox纯合子。flox纯合子又是怎么获得的呢?最初可以通过flox杂合子与flox杂合子交配,概率是25%。所以,如果以flox杂合子作为繁育的起点,那么flox杂合子;Cre 杂合子也可以通过flox杂合子与Cre杂合子交配获得,概率是25%。

我们再顺着捋一捋这个过程,就可以大致得到下面的这张繁育路线图

当然这并不是唯一的繁育路线。事实上,繁育路线的选择还受到很多其它因素的影响,例如:

  • 在涉及两个以上基因的时候,要考虑到它们是否在不同的染色体上?如果在同一条染色体上,就可能会使繁育计划受限。
  • 如果某一种基因型由于突变的基因或插入的基因影响小鼠的生殖或直接引发致死,那么需要相应地调整亲代的基因型来避免繁育的中断。
  • 对于条件性过表达(Rosa26-LSL-geneX)这类小鼠模型,一般最终不需要flox纯合子;Cre杂合子,只需要flox杂合子;Cre杂合子即可。因此繁育过程会简单很多。
  • 对于利用广泛表达的Cre或生殖细胞表达的Cre与flox小鼠交配来获得全身性基因敲除小鼠,精子和/或卵母细胞中的flox序列会被Cre删除,并将删除后的等位基因传递给它们的后代。一旦证明Cre介导的序列敲除已经传递给下一代,最好通过繁育的方法把Cre基因从子代当中去除。

设计完繁育路线,我们就可以在此基础上大致估算需要使用的小鼠数量与整体规模。成本与预算也就基本心里有数了。

这里有几个系数会帮助我们估算完成整个繁育计划所需小鼠的数量。

估算公式:

如果您没有时间管理或易或难的育种项目,南模生物繁育服务可以帮您~ 我们的专业饲养与育种团队可以轻松、经济地为您管理您的小鼠,为您繁育新的品系、快速扩大种群规模、大量获得您需要的实验组与对照组。

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